הצגת המקור של הדף "ביוטכנולוגיה/שיטת ELISA – בוחן אימונואנזימי על מצע מוצק"

'''מטרה :''' קביעת ריכוז ובדיקת נוכחות של נוגדן או אנטיגן בתמיסה. 

'''אופן (עקרונות) :'''
* בדיקה עקיפה.
* מעכב אחר צבע התוצר המתקבל מפעילות האנזים הקשור לנוגדן/אנטיגן שיודע לזהות את אנטיגן/נוגדן המבוקשים - אל הנוגדן/אנטיגן קשור אנזים. הנגדן/אנטיגן נקשרים אל הנוגדנים/אנטיגנים המקובעים למצע. 
* פחות מסוכנת מר"א.
  
'''הערה:''' בפעם הראשון עושים את הבדיקה עם נוגדנים/אנטיגנין מסומנים בריכוז ידוע כדי ליצור גרף.
=Elisa – בדיקת ריכוז Ab בשיטה התחרותית (גרף יורד)=
[[תמונה:ELISA 1.JPG|left|thumb|100px|בדיקת ריכוז Ab בשיטה התחרותית]]
# קישור אנטיגן למצע + חלבון אינרטי.
# מוסיפים תערובת ובה ריכוז של Ab מסומן ודוגמא נבדקת.
# הנוגדנים נקשרים לאנטיגנים המקובעים. בין הנוגדנים (מהדוגמא והמסומנים) יש תחרות על הקישור עם האנטיגן. 
# שטיפה.
# הוספת סובסטרט (לבדיקת הפעילות האנזימטית) – האנזים קשור אל הנוגדנים/אנטיגנים המסומנים. הוא פועל על הסובטרט וכך נוצר צבע. 

'''הערות :'''
*ככל שהגרף יותר גבוהה (כך יש יותר נוגדים הקשורים לאנטיגנים).
* זו היא הבדיקה המקובלת לקביעת ריכוז נוגדני אדמת בזמן הריון.
<br /><br /><br /><br /><br /><br /><br /><br />
= Elisa בדיקת ריכוז אנטיגנים בשיטה התחרותית (גרף יורד)=
[[תמונה:ELISA 2.JPG|left|thumb|100px|בדיקת ריכוז אנטיגנים בשיטה התחרותית ]]
# קישור אנטיגן למצע + חלבון אינרטי
# הוספת אנטיגנים מהדוגמא הנבדקת (משולשים חופשיים) והוספת נוגדן אנזימי מסומן בר"א.
# ישנה תחרות בין האנטיגנים החופשיים למקובעים + שטיפה.
# הוספת סובסטרט (הוא היוצר צבע ונקשר לאנטיגן המסומן). 
<br /><br /><br /><br /><br /><br /><br /><br />
=Elisa בדיקת ריכוז Ab בשיטה הלא תחרותית (גרף עולה)=
[[תמונה:ELISA 3.JPG|left|thumb|100px|בדיקת ריכוז Ab בשיטה הלא תחרותית]]
# קישור אנטיגן למצע + חלבון אינרטי.
# הוספת הדוגמא הנבדקת (<math>\ Y</math>) וקשירת לאנטיגנים. 
# הוספת נוגדן שניוני (<math>\ 2^{nd}Ab</math>) כנגד FC של נוגדן.
#קישור <math>\ 2^{nd}Ab</math> לנוגדן הקשור למצע + שטיפה.
# הוספת סובסטרט הנקשר לנוגדן השניוני ויוצר צבע
<br /><br /><br /><br /><br /><br /><br /><br />

=Elisa בדיקת ריכוז אנטיגנים בשיטה הלא תחרותית (גרף עולה)=
[[תמונה:ELISA 4.JPG|left|thumb|100px|בדיקת ריכוז אנטיגנים בשיטה הלא תחרותית]]
[[תמונה:Elisa.gif|left|thumb|100px|ריכוז אנטיגנים בשיטה הלא תחרותית]]
# קישור Ab לצלחת הבדיקה + חלבון אינרטי + שטיפה.
# הוספת אנטיגנים מהדוגמא הנבדקת (מעוין) שאת ריכוזם ברצוננו לדעת (ככל שיותר אנטיגנים יקשרו, כך כמותם גדולה יותר) .
# הוספת נוגדן מסומן כנגד האנטיגנים + שטיפה
# בדיקת בליעה.
<br /><br /><br /><br /><br /><br /><br /><br />

=קישורים חיצונים=
{{מיזמים|ויקיפדיה=ELISA}}
* [http://libam.ort.org.il/Apps/Public/GetFile.aspx?inline=yes&f=Files/6202BF2E-DF58-4347-9B32-1ECFD84803A3/89EB1005-56CB-46FA-AF21-E819409328BF/4A51F69F-EBC1-47D5-9FC4-5AE780A9F644/CFE2F732-1398-4A65-BF1D-450EBC2A5B59.ppt&n=%D7%A0%D7%95%D7%92%D7%93%D7%A0%D7%99%D7%9D6.ppt נוגדנים ואימונודיאגנוסטיקה (שקופית 10)]
[[קטגוריה : ביוטכנולוגיה]]